Ca2+对角质形成细胞增殖与分化调控的作用研究(2)

http://www.100md.com 2007年9月1日 孙　强　柴家科　梁黎明　杨红明　杜佳梅　王丽环

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     图1不同浓度Ca²⁺对体外培养HKC生长的影响(光镜×100倍)(A：在无钙H-KGM条件下培养5天后，HKC单层生长，克隆形成率较低，细胞基本不增殖； B：含0.5mmol/L Ca²⁺ 的H-KGM培养5天后，HKC单层生长，形成铺路石样外观；C：1mmol/LCa²⁺ 的H-KGM处理3天的HKC，局部细胞出现山丘样的复层结构； D：2mmol/LCa²⁺的H-KGM处理4天后显示HKC 细胞广泛坏死脱落)

    2.2 细胞组织化学(如图2)：与对照组比较，中钙组与高钙组细胞表达K19角蛋白数量明显减少，阳性细胞率与对照组比较具有显著性差异。极高钙组细胞阳性率与低钙组比较差异无显著性，但细胞总量减少，钙通道阻滞剂组、阻滞剂对照组与对照组比较，无显著性差异。

    2.3 MTT结果(如图3)：MTT结果显示，无钙条件下，细胞增殖缓慢，甚至停滞，低钙组、中钙组与高钙组的细胞生存率分别为409.62 %、442.31%、396.15%，与对照组比较P0.05，差异无显著性。在极高钙条件下，细胞生存率为30.77%，与对照组比较有显著性差异(P0.05)，钙通道阻滞剂组与中钙组比较(P

    3 讨论

    3.1 HKC是皮肤组织工程重要的种子细胞，研究其增殖分化的调控机制对于人工活性皮肤的研制具有十分重要的意义。在生理条件下，表皮细胞的增殖与分化是一个涉及多种内外因素协同作用的复杂过程。Ca²⁺是机体内具有活跃生物活性的阳离子，参与多种生理病理活动，如递质释放、心肌电位形成、信号传导等，同时有研究显示，Ca²⁺对多种细胞的增殖与分化具有十分重要的调节作用。

    3.2本研究发现，Ca²⁺在一定范围内具有促HKC增殖作用，并且表现出一定的剂量-效应依赖关系 ......

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